Cum se repornește o coloană C18

Pasul 1

Deconectați coloana C18 din fluxul de flux și înlocuiți coloana în direcția inversă. Rularea solventului înapoi în coloană în direcția opusă va slăbi efectul de ambalare care are loc în timp. Trebuie să aveți grijă să nu pierdeți o cantitate mare de material de ambalaj la capătul coloanei. Unii producători folosesc o plasă mai mare la capătul din amonte al coloanei, astfel încât atunci când direcția fluxului este inversată, plasa mai mare se află în poziția din aval. Această metodă de regenerare se numește spălare înapoi. Pentru a proteja materialul de ambalare care intră în detectorul sistemului și poate provoca un dop, acesta permite funcționarea sistemului fără conectarea detectorului și direcționarea fluxului de ieșire al coloanei către deșeuri.

Pasul 2

Plasați tubul de admisie a solventului într-o serie de solvenți pentru a elua compușii reținuți cu coloana în direcția inversă. Seria de solvenți utilizați variază în funcție de caracteristicile lor hidrofile. Prin modificarea solvenților se vor elua compuși cu aceeași natură hidrofilă. Utilizați 50 ml din fiecare dintre următorii solvenți: apă (dacă utilizați un tampon în solventul dvs.), metanol, izopropanol, diclormetan, hexan, diclormetan și izopropanol.

Pasul 3

Reconectați coloana în orientarea corectă și rulați solventul prin sistem. Utilizați cel puțin 75 ml de solvent pentru a spăla coloana înainte de a continua. Executați un test de injectare al unui standard pe care l-ați executat când coloana a fost nouă și verificați rezultatele. Acordați o atenție deosebită orelor de retenție maximă, cozile de vârf și timpul total de analiză. Gradul în care aceste atribute coincid cu execuția inițială a coloanei atunci când a fost nou va indica gradul în care coloana a fost regenerată. Dacă rezultatele nu sunt satisfăcătoare, înlocuiți coloana cu una nouă și aruncați vechea coloană în coșul de gunoi.